最近一直在做SSR方面的实验,一直在纠结一个问题——SSR到底应该有几条带?通过多方查证,我大致这样理解。
SSR出现多态性主要是因为基序(Motif)的重复次数不一样,而不同个体之间会存在突变,从而导致多态性的发生。但是,应该强调的一点是,SSR跑出来的带应该只是会表示一个等位基因位点。具体原因如下:
SSR侧翼序列都是保守性很强的单一序列,所以才能设计单一的特异引物扩增条带,故一般不会扩增出其它等位位点的条带。所谓的多态性,只是一个等位位点的突变。
所以在PCR时,最好摸索清楚最佳的工作条件,得到尽量清楚的条带。比如水稻的基因组很小,SSR扩增出来很可能就是一条带,为了不给以后的读带工作带来更多麻烦,还是需要在前面的工作中多花些心思。
以上仅为个人见解,望大家指正。
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引物设计没问题。应该就是一条带啊。~~
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@O型天蝎座:
如果是二倍体的话,可能会出现两条带的。
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你是水稻的这个问题不是很简单啦,把引物到基因组序列epcr扩一次,看下可能的产物大小
我在玉米里面倒是常常都有2-3个产物的情况
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有主带,有副带,这很正常嘛~只有共显性带,那是最理想的~
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